一.細(xì)胞切片的免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)介：
通過將玻片浸入細(xì)胞培養(yǎng)基和在玻片上生長(zhǎng)的細(xì)胞來進(jìn)行細(xì)胞玻片的免疫組織化學(xué)染色。它主要用于組織學(xué)和免疫組織化學(xué)。 ，冷凍切片，細(xì)胞涂片，原位雜交等

二.進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)所需的試劑：
乙醇二甲苯蘇木精; PBS緩沖液；3，3′-二氨基聯(lián)苯胺（DAB）

三.細(xì)胞切片免疫組織化學(xué)染色實(shí)驗(yàn)的操作步驟：
1.取出細(xì)胞切片，迅速放入冷丙酮中固定20-30分鐘。 2.在蒸餾水中浸泡兩次，每次約5分鐘。 3.在沖孔液中浸泡5分鐘。 4.在蒸餾水中浸泡兩次，每次約5分鐘。 5.使用普通血清密封：從染色罐中取出切片，擦去切片背面的水分和切片正面組織周圍的水分（以保持組織濕潤(rùn)），并添加正常的山羊血清或兔血清（與二抗相同）動(dòng)物血清）處理，并在37°C下保持約15分鐘。 6.再次添加一抗：用濾紙吸收血清，無需洗滌，直接在37℃下添加一抗約2小時(shí)（也可以在4℃的冰箱中放置過夜）。 7.在PBS緩沖液中：5分鐘，2次（置于搖床上）。 8.在37℃，40分鐘內(nèi)逐滴添加生物素化的二抗。 9.在PBS緩沖溶液中：約5分鐘，2次（置于搖床上）。 10. 37℃40分鐘，再次滴加第三抗體（SAB復(fù)合物）。 11.在PBS緩沖溶液中：5分鐘，2次（置于搖床上）。 12. DAB顯色，在顯微鏡下觀察，并及時(shí)終止（終止自來水沖洗）。 13.用自來水（純凈水）徹底沖洗。 14.蘇木精復(fù)染，室溫下30秒鐘，用自來水沖洗。 15.用自來水沖洗15分鐘，以恢復(fù)藍(lán)色。 16.梯度酒精脫水：80％，2分鐘，95％，2分鐘，100％，2次，5分鐘。 17.二甲苯透明：I和II（二甲苯）各5分鐘18.安裝：加拿大膠（或中性膠）

四、胞攀爬玻片的免疫組化染色注意事項(xiàng)：
1.步驟3和4僅用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)抗原，而在檢測(cè)細(xì)胞膜抗原時(shí)不使用。 2.正常血清的制備步驟：用PBS以1:20的比例制備，并以50μl+ 5μl（10％噴霧量）計(jì)算每片所需的量。